苏畅，宋茜，邵鹏柱，黄家乐，鲁艺，王淑红，王铁杰*
（深圳市药品检验研究院，深圳药品质量标准研究重点实验室，深圳 518057；
香港中文大学中医研究所，香港中文大学生命科学学院， 香港 999077）
摘要：目的：运用多种分子鉴定方法，从技术要求和标准编写方面对蕲蛇饮片现行质量标准提出建议。方法：本研究选取蕲蛇所在蝰科Viperidae蝮亚科Crotalinae的7个近缘物种和9种常见的蕲蛇伪品物种作为研究对象，采用DNA条形码技术扩增16S rRNA序列，运用电泳检视法，根据扩增条带的有无评价模板DNA的质量；16S rRNA序列扩增产物通过双向测序，运用BioEdit软件拼接，双端对齐后剪切比对，利用MEGA 5．1软件构建邻接(NJ)系统发育树；采用蕲蛇饮片现行标准方法进行同步鉴别。结果：l6S rRNA序列的电泳检视结果可有效评价蕲蛇样品的模板DNA质量，避免由于模板DNA质量不佳导致的假阴性结果的可能性；基于16S rRNA条形码序列建立的NJ树可以鉴别蕲蛇饮片及其混淆品；蕲蛇饮片现行标准方法专属性良好。结论：DNA条形码方法、现行标准方法以及NJ树三者相互结合，从不同角度对蕲蛇饮片进行真伪鉴别，有效弥补蕲蛇饮片现行标准方法的不足，为其他中药品种的分子鉴定技术的质量标准制定提供了参考。
关键词：分子鉴定技术；蕲蛇饮片； 中国药典；质量标准； 16S rRNA
该论文发表于《世界科学技术-中医现代化》2016年第18卷第2期
